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一、產(chǎn)品基本信息
BS-0245人可溶性粘附分子(Sam)ELISA試劑盒
檢測原理
采用雙抗體夾心ELISA法:
預(yù)包被單克隆抗體捕獲樣本中SAM抗原
生物素標(biāo)記多克隆抗體作為檢測抗體
TMB顯色系統(tǒng)(450nm測定)實現(xiàn)定量分析
試劑盒組成
組分規(guī)格/說明
預(yù)包被微孔板96孔/板(可拆卸)
SAM標(biāo)準(zhǔn)品0-1000pg/ml梯度濃度
生物素標(biāo)記抗體100×濃縮液
HRP-親和素結(jié)合物100×濃縮液
TMB底物液避光保存
終止液2Mliusuan溶液
二、實驗操作流程
樣本預(yù)處理
血清/血漿:EDTA抗凝,1000×g離心15分鐘
細胞上清:去除沉淀后-70℃分裝保存
標(biāo)準(zhǔn)曲線制備
步驟參數(shù)
稀釋標(biāo)準(zhǔn)品按1:3梯度稀釋(建議7個濃度點)
加樣量每孔100μl
孵育條件37℃ 60分鐘
檢測步驟
1. 加樣:標(biāo)準(zhǔn)品/樣本→生物素抗體→HRP結(jié)合物 2. 洗滌:PBST緩沖液洗板5次(每次浸泡30秒) 3. 顯色:TMB避光反應(yīng)15分鐘→終止液終止
三、質(zhì)量控制要求
指標(biāo)可接受標(biāo)準(zhǔn)
標(biāo)準(zhǔn)曲線R2值≥0.990
板內(nèi)CV≤10%
板間CV≤15%
回收率85-115%
四、注意事項
關(guān)鍵操作
避免反復(fù)凍融標(biāo)準(zhǔn)品(建議分裝儲存)
顯色時間需精確控制(±30秒誤差)
安全警示
終止液具有強腐蝕性(需佩戴護目鏡)
廢液需用10%NaOH中和后處理
數(shù)據(jù)判讀
建議使用四參數(shù)擬合算法(4PL)
溶血/脂血樣本需備注說明
注:以上資料僅供參考,具體請咨詢品牌供應(yīng)商或技術(shù)老師。
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